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'''ColE1'''は[[細菌|バクテリア]]に用いられる[[プラスミド]]。その名前は、 コリシン E1遺伝子（ ''cea''遺伝子）を持っていることに由来している。また、 ''imm''遺伝子を使用して、この産生物からの免疫をコードする。さらに、プラスミドには一連の移動性（ ''mob'' ）遺伝子がある。そのサイズと単一のEcoRI認識部位の存在により、ベクター候補と見なされた <ref>{{Cite journal|last=Hershfield|first=V|year=1974|title=Plasmid ColE1 as a Molecular Vehicle for Cloning and Amplification of DNA|journal=Proceedings of the National Academy of Sciences|volume=71|issue=9|pages=3455–59| |
'''ColE1'''は[[細菌|バクテリア]]に用いられる[[プラスミド]]。その名前は、 コリシン E1遺伝子（ ''cea''遺伝子）を持っていることに由来している。また、 ''imm''遺伝子を使用して、この産生物からの免疫をコードする。さらに、プラスミドには一連の移動性（ ''mob'' ）遺伝子がある。そのサイズと単一のEcoRI認識部位の存在により、ベクター候補と見なされた <ref>{{Cite journal|last=Hershfield|first=V|year=1974|title=Plasmid ColE1 as a Molecular Vehicle for Cloning and Amplification of DNA|journal=Proceedings of the National Academy of Sciences|volume=71|issue=9|pages=3455–59|doi=10.1073/pnas.71.9.3455|pmid=4610576|pmc=433792}}</ref>。 |
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== 複製 == |
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2020年1月25日 (土) 18:32時点における版
ColE1はバクテリアに用いられるプラスミド。その名前は、 コリシン E1遺伝子（ cea遺伝子）を持っていることに由来している。また、 imm遺伝子を使用して、この産生物からの免疫をコードする。さらに、プラスミドには一連の移動性（ mob ）遺伝子がある。そのサイズと単一のEcoRI認識部位の存在により、ベクター候補と見なされた [1]。
複製
ColE1の複製は起点から始まる。このポイントから555bp上流で、RNAポリメラーゼはRNAIIの転写を開始する。RNAIIはプレプライマーとして機能し、 リーダー鎖の合成を開始する。転写産物は、新生RNAと起源DNAの間の相互作用を安定させる二次構造に折りたたまれる。このハイブリッドは、RNA鎖を切断し、3 'ヒドロキシル基を露出するRNase Hによって攻撃される。これにより、DNAポリメラーゼIによるリーディングストランドの伸長が可能になる。ラギングストランド合成は、後で宿主細胞によってコードされたプライマーゼによって開始される。翻訳の阻害は細胞の成長を停止しますが、ColE1の複製は停止しない。 Ropタンパク質の翻訳も阻害されるため、通常のコピー数よりも多いとこれらの細胞が生じる。
コピー数の管理
RNAIはRNAIIの一部の逆転写産物であるため、5 '末端に結合する。これにより、RNAIIのフォールディングが変化し、DNA-RNAハイブリッドが安定化されず、切断が発生しない。このため、高いコピー数では、RNA I濃度の増加により複製が遅くなる。 Ropは二次複製抑制因子であり、RNAI-RNAIIハイブリッドを安定化する。 Ropは、遅い成長率での暴走複製の防止に特に重要となる。
ColE1のコピー数は1細胞当たり10 - 15またはそれ以上。
脚注
- ^ Hershfield, V (1974). “Plasmid ColE1 as a Molecular Vehicle for Cloning and Amplification of DNA”. Proceedings of the National Academy of Sciences 71 (9): 3455–59. doi:10.1073/pnas.71.9.3455. PMC 433792. PMID 4610576.